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  • 2020

    5-11

    RNA提取原理RNA提取時,加lv仿后分三層:水相(含rna,可能還有少量DNA),中間白色薄層(應(yīng)該是蛋白和DNA),下層有機相(lv仿和蛋白等)lv仿是分子量比較大的有機溶劑,在提取RNA時,lv仿可以有效的使有機相和無機相迅速分離。DNA提取過程有機相中主要是酚和蛋白結(jié)合,從而使得蛋白和DNA脫離,DNA進入水相。但是在RNA的提取過程就要避免蛋白和DNA脫離,否則DNA會釋放到水相。不管有酚也好,沒有酚也好,lv仿本身也對蛋白有變性作用,劇烈的震蕩,很容易使得DNA的...

  • 2020

    5-6

    巴氏芽孢桿菌的菌落中等大小,表面光滑濕潤,不透明,稍皺褶,平坦,邊緣不整齊;革蘭氏染色菌體紫色,為革蘭氏陽性菌,桿狀。菌落中等大小,表面光滑濕潤,不透明,稍皺褶,平坦,邊緣不整齊;革蘭氏染色菌體紫色,為革蘭氏陽性菌,桿狀;接觸酶實驗強陽性;氧化酶實驗陰性;糖醇類發(fā)酵試驗:阿拉伯糖陰性;纖維二糖陰性;肌醇陰性;甘露醇陰性;甘露糖陰性;棉籽糖陰性;鼠李糖陰性;水楊苷陰性;山梨醇陽性;蔗糖陰性;海藻糖陽性;木糖陰性;阿東醇陰性;半乳糖陰性.巴氏芽孢桿菌屬于細菌的一種,能形成芽孢(內(nèi)...

  • 2020

    4-23

    溶葡球菌酶(lysozyme)又稱胞壁質(zhì)酶(muramidase)或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶(N-acetylmuramideglycanohydrlase),是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過破壞細胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵,使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,導(dǎo)致細胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細菌溶解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結(jié)合,與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)鹽,使病毒失活。因此,該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。...

  • 2020

    4-3

    RNA甲基化(RNAmethylation)是一類表觀遺傳修飾,在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的超過100種不同的RNA化學(xué)修飾中,主要有6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)、5-甲基胞嘧啶(C5-methylcytidine,m5C)和1-甲基腺嘌呤(N1-methyladenosine,m1A)。RNA甲基化在調(diào)控基因表達、編輯、穩(wěn)定性及降解等方面扮演重要角色。早在20世紀70年代,人們已經(jīng)在真核生物的mRNA和lncRNA中發(fā)現(xiàn)了m6A修飾。但受制于技術(shù)的局限性,...

  • 2020

    3-18

    慢病毒包裝簡要程序:以六孔板中的1孔為例,每個樣品需要1×10∧6個293FT細胞。1、取1.5ml滅菌EP管,加入1.5μg包裝混合質(zhì)粒和0.5μg表達質(zhì)粒以及250μl的無血清OptiMEM。輕柔混勻,室溫孵育5min。2、取1.5ml滅菌EP管,取9μl脂質(zhì)體2000l溶于250μl無血清Opti-MEMI培養(yǎng)基中。輕柔混勻,室溫孵育5min。3、將DNA溶液和脂質(zhì)體溶液輕柔混勻。室溫孵育20min4、用胰酶消化并記數(shù)293FT細胞。用含血清的DMEM培養(yǎng)基重懸細胞。5...

  • 2020

    2-20

    一、自噬誘導(dǎo)劑(1)BredeldinA/Thapsigargin/Tunicamycin:模擬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(2)Carbamazepine/L-690,330/LithiumChloride(氯化鋰):IMPase抑制劑(即Inositolmonophosphatase,肌醇單磷酸酶)(3)Earle's平衡鹽溶液:制造饑餓(4)N-Acetyl-D-sphingosine(C2-ceramide):ClassIPI3KPathway抑制劑(5)Rapamycin:mTOR抑...

  • 2020

    1-8

    巴氏芽孢桿菌在水產(chǎn)上也算是用得比較多了,能夠肥水、凈水、降解氨氮、亞鹽等有害物質(zhì)。這些芽孢的作用大家都清楚,水質(zhì)惡化、底質(zhì)惡化等都能使用芽孢來改善,可是你知道為什么這小小的細菌,卻有這么大的用途嗎?其實上面這些用途都是芽孢的一個能力引申出來的——分解。先說肥水,為什么芽孢能肥水?細菌也會在塘里生長,不會搶奪藻類的營養(yǎng)嗎?首先藻類是不能直接利用有機物的,像殘餌、糞便、尸體等都無法成為藻類生長的助力,而芽孢會將有機質(zhì)分解為無機物,這樣植物就能直接利用這些營養(yǎng)成分了,從而達到肥水的...

  • 2019

    12-27

    細胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結(jié)如下:常見的污染如下:1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理2、霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮...

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